Dados do Trabalho

Título

Análise do humor aquoso de Retinoblastoma por Sequenciamento de Nova Geração (NGS)

Resumo

A informação a respeito de alvos moleculares disponíveis em Retinoblastoma (RB) ainda é limitada, porém os estudos com biópsias líquidas têm ampliado as possibilidades de conhecimento. O HA (Humor Aquoso) é uma fonte importante de material genético derivado do tumor, evidenciando o seu potencial para ser utilizado em biópsias tumorais de RB. Esse estudo avaliou o potencial de informação molecular do HA, através de NGS (Next Generation Sequencing). A análise de biópsia líquida foi realizada em 13 conjuntos de amostras de HA, fragmento tumoral (FT) e sangue periférico (SP), de 12 pacientes com RB, do IOP/GRAACC-UNIFESP, após aceite do Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. As coletas de 100 µl de HA foram realizadas a partir de olhos enucleados e livres de tratamento. Foi utilizado um painel Oncomine™ Childhood Cancer Research Assay (OCCRA-ThermoFisher Scientific), específico para screening de neoplasias pediátricas. Oito (67%) amostras apresentaram SNVs e INDELs exônicos no gene RB1, cinco dessas também sustentavam CNVs nos genes ABL2, MDM4 e/ou MYCN, duas apresentaram apenas CNVs, sem mutações em RB1, e em duas não foi detectada nenhuma alteração molecular. A concordância dos achados moleculares, comparando HA e o tumor correspondente foi de 92%. O mesmo percentual de concordância foi observado ao compararmos o FT com o SP. Entre os casos bilaterais analisados, a concordância entre HA, FT e SP foi de 75%. Em um desses casos, tivemos acesso ao HA e FT de ambos os lados. As quatro amostras desse paciente apresentaram as mesmas alterações: CNVs dos genes ABL2 e MDMA e um InDel (c.933delT) no gene RB1. Este paciente também era portador da mesma mutação de RB1 no SP. A análise do HA, por NGS, mostrou-se ser uma ferramenta de screening eficiente, não apenas do gene RB1, como também para a detecção de eventos adicionais da tumorigênese de RB. O conhecimento dos principais eventos drivers do RB, das alterações do gene RB1 às alterações no número de cópias, podem colaborar com as equipes na determinação de tratamentos mais apropriadas e embasar o aconselhamento familiar. O estabelecimento de protocolos de coleta, extração e processamento de cell free DNA/RNA, não apenas de HA, mas também de tecidos raros como líquor e plasma, podem ampliar as possibilidades de diagnóstico, prognóstico e detecção de doença minimamente disseminada, não só para o RB, mas também para outras neoplasias da infância e adolescência.

Área

Genética/ Terapia de precisão