Dados do Trabalho

Título

Efeito antitumoral de ácido valpróico em modelos in vitro de glioma pediátrico

Resumo

Glioma pediátrico é o tumor de sistema nervoso central mais comum em crianças e adolescentes. Gliomas são classificados em gliomas de baixo e alto grau e os tratamentos empregados para este tumor incluem neurocirurgia, radio e quimioterapia. Apesar dos avanços, uma parcela significativa dos casos apresenta resistência às terapias utilizadas. Em geral, tumores pediátricos possuem baixas taxas de mutações, mas em gliomas pediátricos é recorrente a presença de mutações em histonas H3.1 e H3.3, que contribuem para um perfil epigenético alterado. Assim, um maior entendimento do efeito de moduladores epigenéticos se torna imprescindível para melhor entendimento da biologia dos gliomas pediátricos. O ácido valpróico (VPA), anticonvulsivante de uso pediátrico, possui efeito como inibidor de histonas deacetilases sendo capaz de alterar os níveis de acetilação de histonas. O presente trabalho busca analisar o efeito do VPA em células de glioma pediátrico em diferentes modelos in vitro. Foi avaliada a atividade antitumoral de VPA em culturas 2D (monocamada) e 3D (esferoides) de células KNS-42. A viabilidade das células foi analisada por meio do ensaio de exclusão de azul de tripan. O modelo 3D de esferoides mimetiza as características encontradas no tumor, incluindo resistência a tratamentos. Para este modelo, células de glioma foram cultivadas em DMEM/F12 suplementado com EGF, FGFb, B27, N-2 e albumina em placa de baixa adesão, permitindo a formação de esferoides. Foram feitas duas analises, a primeira verificou o efeito de VPA na formação de esferoides de glioma ao adicionar VPA no primeiro dia de indução e analisar o tamanho dos esferoides após 5 dias. A segunda analise verificou o efeito de VPA no número e tamanho dos esferoides já formados. Após 5 dias da formação, a cultura 3D foi exposta ao tratamento com VPA por 48 horas, os esferoides foram fotografados e a quantidade e o tamanho foram analisados pelo software ImageJ. O trabalho também avaliou efeito antitumoral de VPA em culturas primárias de glioma pediátrico por exclusão de azul de tripan. Os resultados obtidos indicam que VPA possuem um efeito antitumoral dose dependentes em células de glioma e em amostras de cultura primária. Além disso, VPA foi capaz de dificultar a formação de esferoides e reduzir o número de esferoides. Dessa forma, o presente trabalho sugere que VPA, pelo menos in vitro, possui potencial terapêutico antitumoral para gliomas pediátricos.

Área

Neuro-oncologia